H7N9病毒出现抗药性变异

　　本报讯  （记者孙国根）抗病毒“神药”达菲一直是H7N9病毒的“克星”，然而复旦大学上海医学院医学分子病毒学重点实验室主任袁正宏研究员领衔的研究团队证实：个别患者在达菲抗病毒治疗19天后，仍在其咽拭子标本中检测到H7N9病毒核酸，表明该病毒已出现基因突变和耐药趋势。5月29日，该研究论文在线发表在国际顶尖医学杂志《柳叶刀》上。

　　在上海市防控H7N9疫情中，该研究团队承担着检测收治患者标本中H7N9病毒核酸载量的任务。该团队收集了病人治疗过程中多个时间点的咽拭子、血液、尿液和粪便标本，使用自行设计的荧光定量RT-PCR方法对上述标本中的H7N9流感病毒核酸载量进行检测，并对其中14位患者进行了病毒载量与病情严重程度的相关性分析。结果发现，病症相对较轻的患者经达菲治疗后，咽拭子的病毒载量显著下降并较快转阴；而重症患者，特别是在后期需要依靠人工肺治疗的患者，其咽拭子的病毒核酸载量在达菲治疗过程中呈持续阳性，甚至出现载量进一步升高的现象，有个别患者在达菲抗病毒治疗19天后仍在其咽拭子标本中检测到了H7N9病毒核酸。

　　为解释上述临床治疗中出现的“不寻常”现象，袁正宏研究团队对患者标本中H7N9禽流感病毒的两个最重要蛋白HA和NA进行基因序列扩增研究和基因多态性分析， 结果发现两例重症病例在抗病毒治疗过程中其体内H7N9毒株的神经氨酸酶（NA）“292位氨基酸”从R（精氨酸）突变为K（赖氨酸）。也就是说，在治疗早期，292位点是R，而治疗后期这一位点却呈现为K。

　　该实验室运用Q-PCR单核酸多态性分析法进行分析，结果有了更为重大的发现，即病人标本中“292R毒株”竟然出现了逐渐被“292K毒株”取代的过程。该结果强烈提示：这一突变毒株的出现可能与达菲治疗效果不佳有关。该团队联想到“NA R292K”的突变曾出现在季节性H3N2流感病毒上，以后研究证明该病毒对达菲耐药，更为“巧合”的是，在上海地区最早出现的H7N9病毒中也发现存在这一突变，但当时一直不清楚其临床意义。

　　专家指出，本研究的重大意义在于首次将“NA 292位”氨基酸的“R/K突变”与临床达菲疗效不佳和不良预后联系起来，并表明耐药的基因突变可以在临床抗病毒治疗过程中被诱导产生，即药物“压力”会促使患者体内病毒产生变异突变，从而导致H7N9禽流感病毒呈现耐药趋势。

　　上海市H7N9禽流感防治专家组组长、微生物学专家闻玉梅院士认为，该研究结果说明，达菲治疗依然对绝大部分患者有效，一旦确诊应尽早治疗，同时提示在达菲治疗前和治疗过程中必须要对病毒载量和耐药“基因位点”进行密切监测，及时调整治疗方案，以提高救治成功率。闻玉梅说，加快新型抗病毒药物研发已经变得十分重要。