利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌,以测定热力灭菌的效果。菌种用嗜热脂肪杆菌,本菌芽胞对热的抗力较强,其热死亡时间与病原微生物中抗力最强的肉毒杆菌芽胞相似。生物指示剂有芽胞悬液、芽胞菌片以及菌片与培养基混装的指示管。检测时应使用标准试验包,每个包中心部位置生物指示剂2个,放在灭菌柜室的5个点,即上、中层的中央各一个点,下层的前、中、后各一个点。灭菌后,取出生物指示剂,接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,置55-60℃温箱中培养48小时至7天,观察最终结果。若培养后颜色未变,澄清透明,说明芽胞已被杀灭。达到了灭菌要求。若变为黄色混浊,说芽胞未被杀灭,灭菌失败。
灭菌时间如何控制
高压蒸汽灭菌的时间计算,应从灭菌器柜室内达到要求温度时算起,至灭菌完成为止。总时间包括:热力穿透时间,即从消毒柜内达到灭菌温度至消毒物品中心部位亦达到灭菌温度所需时间。时间的长短取决于消毒物品的性质、包装的大小,放置位置和高压锅内空气排空程度和灭菌器的种类。消毒维持时间,即杀灭微生物所需的时间,一般用杀灭脂肪嗜热杆菌芽胞所需时间来表示。在115℃时需30分钟,121℃时需12分钟,132℃时需2分钟。安全时间,一般为维持时间的一半,其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌,不需要安全时间。
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